单分子水平的多重实时荧光检测可以揭示混合物和其他复杂样品中多种分子物种的化学计量、动力学和相互作用。然而,由于低信噪比、高光谱重叠以及需要保持染料的化学兼容性,基于荧光的传感通常仅限于一次检测3-4种颜色。近日,芝加哥大学Allison H. Squires设计了几十种复合荧光标记,并将其称为FRET荧光,其可用于单分子水平的多重光谱测量。
本文要点:
1) FRET荧光是由三种化学成分(DNA、Cy3和Cy5)构建的紧凑纳米结构,由于几何形状、荧光团附着化学和DNA序列的变化,FRET荧光具有可调的光谱性质。
2) 此外,FRET荧光可以标记和检测低浓度(<100 fM)mRNA、dsDNA和使用反布朗电动陷阱蛋白质的混合物。除了识别每个FRET荧光的独特光谱特征外,该陷阱还将附着在目标物上的FRET荧光与未结合的FRET荧光体区分开来,从而实现免清洗传感。
Jiachong Chu et.al Single-molecule fluorescence multiplexing by multi-parameter spectroscopic detection of nanostructured FRET labels Nature Nanotechnology 2024
DOI: 10.1038/s41565-024-01672-8
https://doi.org/10.1038/s41565-024-01672-8