Nature Biomed. Eng.:通过力触发的Cas12a介导的荧光报告链催化裂解检测细胞牵引力
Natt
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2023-11-26
细胞受体产生的分子力是罕见和短暂的,因此难以检测。鉴于此,埃默里大学Khalid Salaita、Roman Sniecinski等人报道了一种利用CRISPR相关蛋白12a(Cas12a)来扩增对由多达50个粘附细胞产生的细胞牵引力的检测的测定。
该测定涉及固定用细胞受体特异性配体修饰的DNA双链体。数十皮牛顿的牵引力触发双链体的脱氮,暴露出一条神秘的Cas12激活链,该链引发Cas12介导的荧光报告链的无差别切割。
研究人员使用该测定法,使用单次抽血中的人类血小板进行了数百次力测量,以提取一组抗血小板药物的个性化剂量-反应曲线和一半最大抑制浓度。对于7名接受过体外循环的患者,血小板功能障碍与需要输注血小板以限制出血密切相关。Cas12a介导的细胞牵引力检测可用于评估细胞状态,并筛选调节细胞力学的基因、细胞粘附配体、药物或代谢产物。

参考电竞投注官网
:
Duan, Y., Szlam, F., Hu, Y. et al. Detection of cellular traction forces via the force-triggered Cas12a-mediated catalytic cleavage of a fluorogenic reporter strand. Nat. Biomed. Eng 7, 1404–1418 (2023).
https://doi.org/10.1038/s41551-023-01114-1
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