膜结合颗粒甲烷单加氧酶(pMMO)可以催化甲烷氧化为甲醇。铜是pMMO活性所必需的,几十年的结构和光谱研究试图在三个候选位点中鉴定活性位点:CuB、CuC和CuD位点。美国西北大学Amy C. Rosenzweig、Brian M. Hoffman最近表明,将pMMO重建成天然脂质纳米盘可以稳定其结构并恢复其活性。
本文要点:
1) 作者将这种活性样品与2,2,2-三氟乙醇进行培养,该产物类似物可用作活性位点探针。作者用脉冲电子核双共振光谱和冷冻电子显微镜观察了2,2,2-三氟乙醇和CuD位点之间的相互作用,表明CuD是甲烷氧化的位点。
2) 此外,作者发现在平行样品上使用这些正交技术是一种有效的方法,其可以避免解释金属酶冷冻电子显微镜图谱的困难。
Frank J. Tucci et.al Product analogue binding identifies the copper active site of particulate methane monooxygenase Nature Catalysis 2023
DOI: 10.1038/s41929-023-01051-x
https://doi.org/10.1038/s41929-023-01051-x