随着荧光蛋白开发的发展,大量多样的近红外荧光蛋白(NIR-FP)随之产生,这些蛋白正迅速成为各种成像应用的探针。然而,NIR-FPs的多样性给用户在为特定应用选择最佳FPs方面带来了挑战。在这里,西湖大学Kiryl D. Piatkevich对22种NIR-FP在培养的哺乳动物细胞和原代小鼠神经元中的细胞内亮度、光稳定性、寡聚状态、化学稳定性和细胞毒性进行了系统和定量评估。
本文要点:
1) 作者鉴定了一组性能最佳的FP,其中包括emiRFP670、miRFP680、miRFP713和miRFP720,它们可以覆盖大多数成像应用。
2) 此外,表现最好的蛋白质被进一步验证用于秀丽隐杆线虫、斑马鱼、小鼠以及小鼠肝脏中神经元的体内成像。作者还评估了所选NIR-FP在融合的多色成像、膨胀显微镜和双光子成像中的适用性。
Hanbin Zhang et.al Quantitative assessment of near-infrared fluorescent proteins Nature Methods 2023
DOI: 10.1038/s41592-023-01975-z
https://doi.org/10.1038/s41592-023-01975-z