常规核酸检测技术通常依靠扩增来提高灵敏度，但存在扩增偏倚、操作复杂、对复杂仪器要求高、气溶胶污染等缺点。南方科技大学蒋兴宇和Jiuxin Qu等人开发了一种基于CRISPR/Cas13a和微孔阵列的核酸富集和单分子数字检测的综合检测方法。

本文要点

（1）在该方法中，磁珠从大体积的样本中捕获并浓缩目标，然后将靶诱导的CRISPR/Cas13a切割反应分散并限制在一百万个单独的毫微微级大小的微孔中，从而增强局部信号强度以实现单分子检测。

（2）该检测方法对严重急性呼吸系统综合征冠状病毒2型的无扩增检测极限可达2 aM。该研究的实施将建立一种无扩增的“样本输入-应答-输出”单一RNA检测技术，并在缩短检测时间的同时提高灵敏度和特异性。

Dou Wang, et al. An Integrated Amplification-Free Digital CRISPR/Cas-Assisted Assay for Single Molecule Detection of RNA. ACS Nano. 2023

DOI：10.1021/acsnano.2c10143

https://pubs.acs.org/doi/10.1021/acsnano.2c10143