近年来,人们越来越重视细胞外囊泡(EV)的异质性,此外,最近还发现了两种非囊性细胞外纳米颗粒(NVEP),即胞外颗粒和超胞外颗粒,它们富含许多以前属于EV的货物。近日,来自范德比尔特大学医学中心医学系的Robert J. Coffey等人开发了一个全面的分步方案,用于从相同的起始材料中顺序分离大和小EV、非囊性组分和外泌体等。
文章要点:
1) 该研究系统探究了使用差速超速离心、过滤、浓缩和高分辨率密度梯度分级来获得EV和NVEP不同群体的纯化级分,该方案能够将感兴趣的生物分子分配和富集到其特定的细胞外室,与其他分离方法相比,该研究开发的这一方案具有独特的优势,包括高纯度和重复性,所需专业知识最少;
2) 此外,该方案可用于从细胞培养基和人血浆中纯化EV和NVEP,需要约72小时即可完成,该方案的采用将有助于转化研究者识别一系列人类疾病的潜在循环生物标志物和治疗靶点,学并使基础科家更好地了解EV和NVEP的生物发生和功能。
参考资料:
Zhang, Q., Jeppesen, D.K., Higginbotham, J.N. et al. Comprehensive isolation of extracellular vesicles and nanoparticles. Nat Protoc (2023).
DOI: 10.1038/s41596-023-00811-0
https://doi.org/10.1038/s41596-023-00811-0